51.轉(zhuǎn)錄:體系包括DNA模板、4種NTP、RNA聚合酶、某些蛋白質(zhì)因子和必要的無(wú)機(jī)離子。
轉(zhuǎn)錄模板:模板鏈(Watson鏈)、編碼鏈(Crick鏈)。
原核生物RNA-pol:5個(gè)亞基,α2決定轉(zhuǎn)錄基因類(lèi)型,β形成磷酸二酯鍵(催化),β'開(kāi)鏈,σ辨認(rèn)起始點(diǎn)。ρ因子終止。
真核生物RNA-pol:Ⅰ:核仁,→45S-rRNA;Ⅱ:核漿,→hnRNA→mRNA;Ⅲ:核漿,→tRNA、5S-rRNA、snRNA。
mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工:首尾修飾(5'-加帽、3'-加尾),mRNA剪接(剪除內(nèi)含子、連接外顯子)。內(nèi)含子:被轉(zhuǎn)錄,不被翻譯。外顯子:被轉(zhuǎn)錄和翻譯。
52.翻譯:體系包括原料(20種氨基酸)、模板(mRNA)、適配器(tRNA)、裝配機(jī)(核糖體)、其他(多種蛋白質(zhì)因子、酶等)。
密碼子有方向性、連續(xù)性、簡(jiǎn)并性(一種氨基酸可有兩個(gè)或兩個(gè)以上密碼子)、通用性、擺動(dòng)性(第一位堿基I對(duì)應(yīng)mRNA上可C、U、A)。
起始密碼:AUG
終止密碼:UAA、UAG、UGA
無(wú)遺傳密碼的:羥脯氨酸、羥賴(lài)氨酸
只有1個(gè)密碼的:甲硫氨酸、色氨酸
密碼與起始密碼相同的:甲硫氨酸
氨基酸活化方式:生成氨基酰-tRNA。
肽鏈的合成:起始→延長(zhǎng)(進(jìn)位、成肽、轉(zhuǎn)位)→終止。
53.四環(huán)素、土霉素:抑制氨基酰-tRNA與原核生物核糖體小亞基結(jié)合。
紅霉素、氯霉素:與原核生物核糖體大亞基結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)肽酶。
鏈霉素:與原核生物核糖體小亞基結(jié)合,致讀碼錯(cuò)誤。
放線(xiàn)菌酮作用于真核,嘌呤霉素、伊短菌素作用于真核+原核。
蓖麻蛋白作用于真核生物大亞基。
白喉毒素主要抑制哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)合成。
干擾素活化蛋白激酶而使起始因子eIF-2磷酸化,從而抑制病毒蛋白質(zhì)合成,誘導(dǎo)產(chǎn)生寡核苷酸2'-5'A。
54.基因組:來(lái)自一個(gè)生物體的一整套遺傳物質(zhì)。
基因表達(dá):轉(zhuǎn)錄和翻譯。并非都產(chǎn)生蛋白質(zhì)。有時(shí)間特異性和空間特異性。
基因表達(dá)方式:基本表達(dá)(組成性表達(dá))、誘導(dǎo)/阻遏。
管家基因:一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),較少受環(huán)境影響,只受啟動(dòng)程序或啟動(dòng)子與RNA-pol作用的影響。
可誘導(dǎo)或可阻遏基因:易受環(huán)境變化的影響,產(chǎn)物水平增高或降低,如DNA損傷時(shí)的修復(fù)酶基因、乳糖操縱子機(jī)制。
55.轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的基本控制點(diǎn)。
原核基因表達(dá)調(diào)控:乳糖操縱子。
操縱子:原核生物絕大多數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇地串聯(lián)、密集在染色體上,共同組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。一個(gè)操縱子含有一個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因。轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)。
乳糖操縱子=3個(gè)結(jié)構(gòu)基因Z、Y、A+操縱序列O+啟動(dòng)序列P+調(diào)節(jié)基因I+分解物基因激活蛋白CAP。
調(diào)節(jié)機(jī)制=阻遏蛋白負(fù)性調(diào)節(jié)+CAP正性調(diào)節(jié)。
P與RNA聚合酶結(jié)合。I編碼阻遏蛋白,與O結(jié)合。
CAP結(jié)合位點(diǎn)可與DNA、cAMP結(jié)合,產(chǎn)生正性調(diào)節(jié)。
能與阻遏基因結(jié)合使操縱基因關(guān)閉:色氨酸;使其開(kāi)放:乳糖。
輔阻遏蛋白可使阻遏蛋白變構(gòu)并促進(jìn)其與操縱基因結(jié)合。
56.真核基因組:不連續(xù),大量重復(fù)序列,單順?lè)醋印?/P>
原核基因組:連續(xù),重復(fù)序列少,多順?lè)醋印?/P>
真核基因表達(dá)調(diào)控:順式作用元件(啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、沉默子)+調(diào)節(jié)蛋白(反式作用因子影響另一基因表達(dá),順式作用因子影響自身基因的表達(dá))。
啟動(dòng)子:轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)+功能組件(TATA盒、GC盒、CAAT盒),與RNA-pol穩(wěn)定結(jié)合的一段DNA序列。
57.重組DNA技術(shù)的工具酶:限制性核酸內(nèi)切酶(識(shí)別特異序列,切割DNA,Ⅱ類(lèi)識(shí)別序列呈回文結(jié)構(gòu))、DNA連接酶(將目的基因與載體DNA拼接)、DNA聚合酶Ⅰ、Klenow片段(cDNA第二鏈合成,雙鏈DNA3'-末端標(biāo)記)、反轉(zhuǎn)錄酶、多聚核苷酸激酶、末端轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶。
目的基因:cDNA、基因組DNA。
基因載體:質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA、病毒DNA。
質(zhì)粒:小型環(huán)狀雙鏈DNA分子,有自我復(fù)制能力,可攜帶抗藥性基因,可含有克隆位點(diǎn)。
步驟:分→切→接→轉(zhuǎn)→篩→表達(dá)。
聚合酶鏈反應(yīng)PCR:變性溫度96℃,引物退火溫度55℃,引物延伸溫度72℃。
基因工程技術(shù):分子雜交技術(shù),DNA探針技術(shù),質(zhì)粒重組技術(shù)。
分子生物學(xué)技術(shù):DNA印跡技術(shù)(Southern),RNA印跡技術(shù)(Northern),蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(Western)。
58.癌基因:能編碼生長(zhǎng)因子、生長(zhǎng)因子受體、細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)信息傳遞分子,以及與生長(zhǎng)有關(guān)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的基因。
原癌基因:廣泛存在,高度保守性,無(wú)害必需,可致癌變。
病毒癌基因:存在于腫瘤病毒中,能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
抑癌基因:抑制細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)增殖從而遏制腫瘤形成。P53、Rb、P16、APC、DCC等。
fms、erbB、trk產(chǎn)物為生長(zhǎng)因子受體。
59.第一信使:細(xì)胞間信息物質(zhì)。第二信使:細(xì)胞內(nèi),環(huán)磷酸腺苷cAMP、環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷cGMP、Ca2+、1,4,5-三磷酸肌醇IP3、1,2-二酰甘油DAG、神經(jīng)酰胺Cer。第三信使:細(xì)胞核內(nèi)外。
細(xì)胞信息物質(zhì):神經(jīng)遞質(zhì)、內(nèi)分泌激素、局部化學(xué)介質(zhì)、氣體信號(hào)。
受體:膜受體、胞內(nèi)受體。受體配體結(jié)合有高度專(zhuān)一性(取決于結(jié)合域的構(gòu)象和活性基團(tuán))、高度親和力、可飽和性、可逆性、特定作用模式。
G蛋白:鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白,偶聯(lián)的受體是蛇型受體。
60.受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制:
cAMP-蛋白激酶途徑:激素+受體→G蛋白→腺苷酸環(huán)化酶AC→cAMP→蛋白激酶PKA→生物學(xué)效應(yīng)。
Ca2+-磷脂依賴(lài)性蛋白激酶途徑:激素+受體→G蛋白→磷脂酶PLC→DAG+IP3位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(→Ca2+)→蛋白激酶PKC→生物學(xué)效應(yīng)。激活的PKC能磷酸化的氨基酸殘基是絲氨酸/蘇氨酸。
cGMP-蛋白激酶途徑:激素+受體→G蛋白→鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶GC→cGMP→蛋白激酶PKG→生物學(xué)效應(yīng)。
酪氨酸蛋白激酶通路:受體型PTK-Ras-MAPK途徑(細(xì)胞膜上)、JAK-STAT途徑(胞質(zhì)中)。
胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑:類(lèi)固醇激素、甲狀腺素,轉(zhuǎn)錄水平影響。
61.G蛋白游離的α亞基GTP可激活腺苷酸環(huán)化酶。G蛋白結(jié)合GDP后可使α亞基與效應(yīng)蛋白解離。
鹽皮質(zhì)激素能透過(guò)細(xì)胞膜并與細(xì)胞內(nèi)受體結(jié)合。
胰島素通過(guò)細(xì)胞膜受體發(fā)揮作用,抑制腺苷酸環(huán)化酶,激活磷酸二酯酶。
磷酸二酯酶激活后直接引起cAMP濃度降低。
腺苷酸環(huán)化酶位于細(xì)胞膜;細(xì)胞內(nèi)Ca+儲(chǔ)存于內(nèi)質(zhì)網(wǎng);性激素受體位于細(xì)胞核。
62.血液占體重8%。重要陽(yáng)離子:Na+、K+、Ca2+、Mg2+;重要陰離子:Cl-、HCO3-、HPO42-。
血清蛋白電泳分離陽(yáng)極→陰極(快→慢):清蛋白(最主要),α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白,γ球蛋白。γ球蛋白由漿細(xì)胞合成,其他均由肝合成。
清蛋白可維持膠體滲透壓(占總的75~80%),可結(jié)合運(yùn)輸脂肪酸、Ca2+、膽紅素、磺胺。
63.血紅蛋白=珠蛋白+血紅素。
血紅素合成:原料:甘氨酸、琥珀酰CoA、Fe2+。關(guān)鍵酶:ALA合酶,輔酶:磷酸吡哆醛。鉛干擾其合成。
2,3-BPG是紅細(xì)胞能量?jī)?chǔ)存形式,調(diào)節(jié)血紅蛋白運(yùn)氧能力。糖醛酸途徑為紅細(xì)胞提供NADH。
肌肉能量?jī)?chǔ)存形式:磷酸肌酸+糖原。腦組織中:磷酸肌酸。
64.肝的生物轉(zhuǎn)化:最常見(jiàn)部位在微粒體。意義:解毒排毒。
第一相反應(yīng):氧化、還原、水解,微粒體依賴(lài)的加單氧酶系最重要。
第二相反應(yīng):結(jié)合,葡糖醛酸結(jié)合反應(yīng)最普遍。
65.膽汁:主要成分膽汁酸鹽。膽汁酸合成部位:肝細(xì)胞微粒體和胞液。
初級(jí)膽汁酸:膽酸、鵝脫氧膽酸及其與甘氨酸、;撬峤Y(jié)合的產(chǎn)物。
次級(jí)膽汁酸:脫氧膽酸、石膽酸及其在肝中的結(jié)合產(chǎn)物。
游離型膽汁酸:膽酸、鵝脫氧膽酸、脫氧膽酸、石膽酸。
結(jié)合型膽汁酸:甘氨膽酸、;悄懰、甘氨鵝脫氧膽酸、牛磺鵝脫氧膽酸。
66.血紅素—血紅素加氧酶→膽綠素—膽綠素還原酶→膽紅素—還原→膽素原—氧化→膽素
膽色素=膽紅素+膽綠素+膽素原+膽素。
膽素原=d-尿膽素原+中膽素原+糞膽素原。
膽素=d-尿膽素+i-尿膽素+糞膽素。
膽汁主要色素:膽紅素。尿液主要色素:尿膽素。糞便主要色素:糞膽素。
尿液排出:尿膽素原+尿膽素。糞便排出:糞膽素原+糞膽素。
進(jìn)行腸肝循環(huán),經(jīng)腸道被腸黏膜重吸收:膽素原。
膽紅素血內(nèi)運(yùn)輸形式:膽紅素白蛋白;肝細(xì)胞存在形式:膽紅素配體蛋白;肝臟排出形式:膽紅素葡萄糖醛酸酯。
67.未結(jié)合(游離)膽紅素:未與葡糖醛酸結(jié)合,與重氮試劑反應(yīng)慢、間接陽(yáng)性,水溶性小,脂溶性大,不能經(jīng)腎隨尿排出,對(duì)細(xì)胞膜通透性大,腦毒性大。
結(jié)合(直接)膽紅素:與葡糖醛酸結(jié)合,與重氮試劑反應(yīng)迅速、直接陽(yáng)性,水溶性大,脂溶性小,能經(jīng)腎隨尿排出,對(duì)細(xì)胞膜通透性小,無(wú)腦毒性。
【生化】完結(jié)
磷脂:HDL>LDL>VLDL>CM
膽固醇:LDL>HDL>VLDL>CM
甘油三酯:CM>VLDL>LDL>HDL
顆粒直徑:CM>VLDL>LDL>HDL
高脂血癥:成人空腹12~24h血甘油三酯>2.26mmol/L、膽固醇>6.21mmol/L,兒童膽固醇>4.14mmol/L。高脂血癥中一般無(wú)HDL升高。
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