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糖鏈的結(jié)構(gòu)測定
要測定糖鏈的結(jié)構(gòu)主要是解決三個(gè)問題：單糖的組成、糖與糖的連接位置和順序、苷鍵的構(gòu)型。
(一)分子量的測定
苷的分子量測定目前大多采用質(zhì)譜法。但由于其極性大導(dǎo)致熱揮發(fā)性差，電子轟擊法(EI)和化學(xué)電離(CI)常不能得到理想的結(jié)果，一般采用場解吸(FD)、快原子轟擊(FAB)、電噴霧(ESI)等方法獲得[M+H]+、[M+Na]+等準(zhǔn)分子離子峰。
(二)單糖的鑒定
首先要了解苷中糖鏈由哪些單糖所組成，各種單糖之間的比例如何。一般是將苷鍵全部酸水解，然后用紙色譜檢出單糖的種類。經(jīng)顯色后用薄層掃描儀求得各種糖的分子比。單糖的定性定量也可以通過苷全甲基化并水解后得到的甲基化單糖的氣相色譜測定，但需要各種各樣的甲基化單糖作標(biāo)準(zhǔn)品。
(三)單糖之問連接位置的確定
將苷全甲基化，然后水解苷鍵，鑒定所有獲得的甲基化單糖，其中游離的一OH的部位就是連接位置。水解要盡可能溫和，否則會(huì)發(fā)生去甲基化反應(yīng)和降解反應(yīng)。
(四)糖鏈連接順序的確定
(五)苷鍵構(gòu)型的決定
糖的鑒定
苷類水解所得到的各種單糖和低聚糖的結(jié)構(gòu)大多數(shù)是已知的，只要與各種已知糖的標(biāo)準(zhǔn)品對照就可加以鑒定。但由于糖的水溶性很大，不易獲得結(jié)晶，有些物理常數(shù)無法測定，給印證工作帶來困難。以前多用化學(xué)方法制成衍生物，再作分離鑒定，步驟多，工作量大。而現(xiàn)在各種色譜技術(shù)的應(yīng)用，給糖類的鑒定帶來了極大的方便。
(一)紙色譜
(二)薄層色譜
(三)氣相色譜
(四)離子交換色譜
(五)液相色譜
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