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　　結構研究中采用的主要方法

　　(一)確定分子式并計算不飽和度

　　分子式的測定目前主要有以下幾種方法，可因地制宜加以選用。

　　(1)元素定量分析配合分子量測定。

　　(2)同位素豐度比法。

　　(3)高分辨質譜(HR—MS)法。

　　(三)紅外光譜

　　(四)紫外一可見吸收光譜

　　(五)核磁共振譜

　　顯然，改變某個13C核周圍的化學環(huán)境或電子密度，如引入某個取代基，則該13C信號即可能發(fā)生位移(取代基位移，substitution shift)。位移的方向(高場或低場)及幅度已經(jīng)累積了一定經(jīng)驗規(guī)律。常見的有苯的取代基位移、羥基的苷化位移(glycosylation shift)和�；�位移(acylation shift)等，在結構研究中均具有重要的作用，詳見有關章節(jié)。

　　此外，二維核磁共振技術的飛速發(fā)展為中藥化學成分的研究提供了更加簡捷可靠的方法和手段。

　　化合物的純度測定

　　在結構研究前首先確定化合物的純度。純度不合格，會給結構測定工作帶來難度，甚至會導致結構測定工作的失敗。純度檢查的方法很多，如檢查有無均勻一致的晶形，有無明確、敏銳的熔點等。但是最常應用的還是各種色譜方法，如在TLC或Pc上選擇適當?shù)恼归_劑，分別將樣品推至薄層板(或濾紙)的不同位置，并在可見光、uV光下觀察，或者噴以一定的顯色劑(其中必有一種為通用顯色劑)進行觀察。一般，只有當樣品在三種展開系統(tǒng)中均呈現(xiàn)單一斑點時方可確認其為單一化合物。個別情況下，甚至須采用正相和反相兩種色譜方法加以確認。另外，氣相色譜(GC)也是判斷物質純度的一種重要方法，但只適用于在高真空和一定加熱條件下能夠氣化而不被分解的物質。

　　HPLC則不然，不受GC那樣的條件限制。與GC一樣，HPLC也有用量少、時間快、靈敏度高及準確的特點，但兩者均須配置價格昂貴的儀器設備。

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