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　　酶和代謝物分析技術(shù)

　　1.酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)定量時(shí)的觀察對象是

　　A、總單位時(shí)間內(nèi)酶的減少或增加的量

　　B、單位時(shí)間內(nèi)酶的減少或增加的量

　　C、總反應(yīng)時(shí)間內(nèi)酶的減少或增加的量

　　D、總反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物減少或產(chǎn)物增加的量

　　E、總單位時(shí)間內(nèi)底物減少或產(chǎn)物增加的量

　　參考答案: E

　　題目解析:酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)主要研究酶催化反應(yīng)的過程與速率，以及各種影響酶催化速率的因素，定量時(shí)的觀察對象是總單位時(shí)間內(nèi)底物的減少或產(chǎn)物增加的量。

　　2.在酶活性測定的試劑中，哪一種試劑最重要( )。

　　A、活化劑種類和濃度

　　B、復(fù)構(gòu)劑種類和濃度

　　C、抑制劑種類和濃度

　　D、輔因子的濃度

　　E、底物的種類和濃度

　　參考答案: E

　　3.溫度對酶促反應(yīng)的影響是

　　A、每增加10℃，酶促反應(yīng)速度增加1～2倍

　　B、能降低酶促反應(yīng)的活化能

　　C、超過37℃后，溫度升高時(shí)，酶促反應(yīng)變慢

　　D、一般地說，在25～35℃之間，溫度每增加10℃，酶促反應(yīng)速度增加1～2倍

　　E、溫度可影響酶促反應(yīng)的平衡點(diǎn)

　　參考答案: D

　　題目解析:化學(xué)速度隨溫度升高而加快，酶反應(yīng)也不例外。Q10值即溫度增加10℃，化學(xué)速度的變化率。酶的Q10值在1.5～2.5。其溫度影響很大，不同的溫度酶反應(yīng)的速率不同，將直接影響測定結(jié)果。常規(guī)工作實(shí)驗(yàn)室越來越多的使用37℃。因?yàn)闇囟壬�高，反�?yīng)速度快，靈敏度高。同時(shí)延滯時(shí)間和測定時(shí)間都可能縮短，從而有利于提高工作率。在37℃時(shí)，不可避免地一些酶可能失活

　　4.下列說法錯(cuò)誤的是

　　A、以脫氫酶為指示酶的系統(tǒng)測定的是輔酶Ⅰ(NAD+)或輔酶(NADP+)在540nm處的吸光度增高來計(jì)算出被測物的濃度

　　B、最常用的耦聯(lián)指示系統(tǒng)有兩個(gè)：一個(gè)是脫氫酶系統(tǒng)，另一個(gè)為氧化酶系統(tǒng)。

　　C、可利用脫氫酶的逆反應(yīng)，將NAD(P)H變?yōu)镹AD(P)，測定340nm處吸光度的下降來計(jì)算被測物的濃度

　　D、終點(diǎn)法受到乳糜、黃疸和溶血的影響，測定時(shí)需設(shè)定樣品空白

　　E、為了消除內(nèi)源性脫氫酶的干擾，在反應(yīng)時(shí)一般加入乳酸脫氫酶的抑制劑

　　參考答案: A

　　題目解析:以脫氫酶為指示酶的系統(tǒng)測定的是輔酶Ⅰ(NAD+)或輔酶(NADP+)在340nm處的吸光度增高來計(jì)算出被測物的濃度，也可利用脫氫酶的逆反應(yīng)，將NAD(P)H變?yōu)镹AD(P)，測定340nm處吸光度的下降來計(jì)算被測物的濃度。

　　5.SI制的酶單位Katal的含義( )。

　　A、每秒鐘能催化1μmol底物的酶量為1Katal

　　B、每分鐘能催化1μmol底物的酶量為1Katal

　　C、每秒鐘能催化1個(gè)單位的底物的酶量為1Katal

　　D、每秒鐘能催化1mol的底物的酶量為1Katal

　　E、每分鐘能催化1個(gè)單位的底物的酶量為1Katal

　　參考答案: D

　　題目解析:近年來國際上大力推廣SI制，我國已明確SI制為法定計(jì)量單位制，此時(shí)酶活性單位為Katal，即1秒中轉(zhuǎn)化1個(gè)摩爾底物的酶量，常用單位為μKatal或nKatal。

　　6.在何種情況下反應(yīng)速度可達(dá)最大反應(yīng)速度

　　A、產(chǎn)物濃度足夠大

　　B、底物濃度足夠大

　　C、底物濃度足夠小

　　D、產(chǎn)物濃度足夠小

　　E、酶濃度足夠小

　　參考答案: B

　　題目解析:在檢測試劑中底物濃度、輔因子、活化劑、復(fù)構(gòu)劑的種類和濃度均對酶的測定至關(guān)重要。其中以底物的種類和濃度最為重要。一般而言，在多種底物中，Km最小的底物往往是此酶的生理底物。選擇Km小的底物測定酶還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，就是在最大反應(yīng)速度V的底物濃度也將最低。在實(shí)際工作中可能意味著試劑成本可能較低，不易出現(xiàn)底物難溶解的困難。

　　7.關(guān)于酶活性國際單位下列說法正確的是

　　A、1s能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(μmol)的酶量為一個(gè)國際單位(μmol/min)

　　B、1min能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(μmol)的酶量為一個(gè)國際單位(μmol/min)

　　C、1h能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(μmol)的酶量為一個(gè)國際單位(μmol/min)

　　D、1min能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(mmol)的酶量為一個(gè)國際單位(mmol/min)

　　E、1h能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(mmol)的酶量為一個(gè)國際單位(μ=mmol/min)

　　參考答案: B

　　題目解析:酶活性國際單位是1min能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物(μmol)的酶量為一個(gè)國際單位(μmol/min)。

　　8.下列說法錯(cuò)誤的是

　　A、在檢測試劑中底物濃度、輔因子、活化劑、復(fù)構(gòu)劑的種類和濃度均對酶的測定至關(guān)重要

　　B、以底物的種類和濃度最為重要

　　C、米氏方程在選擇酶測定底物濃度有著重要的指導(dǎo)作用

　　D、在多種底物中，Km最大的底物往往是此酶的生理底物

　　E、pH影響酶的穩(wěn)定

　　參考答案: D

　　題目解析:一般而言，在多種底物中，Km最小的底物往往是此酶的生理底物。選擇Km小的底物測定酶還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，就是在最大反應(yīng)速度V的底物濃度也將最低。在實(shí)際工作中可能意味著試劑成本可能較低，不易出現(xiàn)底物難溶解的困難。

　　9.影響酶活性測定的因素下列選項(xiàng)最合適的是

　　A、試劑中表面活性劑的作用

　　B、酶反應(yīng)的最適pH

　　C、最適溫度

　　D、底物濃度

　　E、以上都是

　　參考答案: E

　　題目解析:影響酶活性的因素包括底物的濃度、酶反應(yīng)的最適pH、最適溫度、酶的抑制作用，另外還包括試劑中表面活性劑的作用等因素。

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